Техниката, с която ДНК Вмъкване и вектор молекули се усвоява с две различни ограничение ензими да създаде не допълващи прилепващи краища в двата края на всяко ограничение фрагмент, така че позволява Вмъкване, за да бъдат свързани към вектор в специфична ориентация и предотвратяване на вектора от повторно circularizing.