Une type II endonucléase de restriction qui lie (et par la suite s'attache) ADN à des sites qui contiennent une séquence de quatre paires de nucléotides qui est uniquement reconnue par cette enzyme. Parce que n'importe quelle séquence de quatre bases survient plus fréquemment par les chances que n'importe quelle séquence de six bases, coupeurs de quatre-base se clivent plus fréquemment que les coupeurs de six-base. Donc, coupeurs de quatre-base créer des fragments plus petits que la base de six couteaux.