Egy enzim, amely katalizálja a reakció, amely összeköti a két DNS-molekulák keresztül a kialakulását egy foszfo-diészter kötés között a 3´ hidroxil és 5´-foszfát a szomszédos nukleotidok. Ez fontos szerepet játszik a DNS repair és a replikáció. DNS-ligáz egyike a legfontosabb eszközök a rekombináns DNS-technológia, felhatalmazó (többek között) az idegen DNS-t beillesztése vektorok. Phage T4 általánosan használt gén klónozás kísérletek által kódolt ligáz enzim. Igényel, mint egy társ-faktor ATP. T4 használt in vitro csatlakozzon a vektor és helyezze be a KNH-k.