אנזים זה catalyses התגובה המקשר בין שתי מולקולות DNA דרך היווצרות פוספו-diester הקשר בין פוספט הידרוקסיל, 5´ 3´ של נוקלאוטידים סמוכים. זה ממלא תפקיד חשוב ב- DNA לתקן ושכפול. DNA ליגאז הוא אחד הכלים החיוניים של טכנולוגיית דנ א רקומביננטי, הפעלת (בין היתר) שילוב של דנ א זר לתוך וקטורים. את האנזים ליגאז מקודד על ידי phage ש-t4 הוא נפוץ בניסויים שיבוט גנטי. היא דורשת ATP כגורם משותף. T4 הוא בשימוש במבחנה להצטרף וקטור, להוסיף DNAs.