Technika kuri DNR įterpti ir Vektorius molekulės yra suardomas su dviejų skirtingų apribojimas fermentų sukurti ne-papildomi lipnus galai jėgas kiekvieno apribojimo fragmentas, tad, įterpti į galima susieti su vektoriaus į konkrečią padėtį ir užkirsti kelią vektoriaus iš naujo circularizing.