Uzupełnienie DNA podwójnej nici mRNA sekwencji; syntetyzowanej in vitro z dojrzałych szablonu RNA z użyciem odwrotnej transkryptazy (w celu utworzenia pojedynczych nici DNA z szablonu RNA) i DNA Polimeraza (w celu utworzenia dwuniciowego DNA). Przygotowania cDNAs często jest pierwszym krokiem do klonowania sekwencji DNA zainteresowania. Stosowane jako szczególne i wrażliwe sondy w badaniach hybrydyzacji, bo cDNAs zwykle nie zawierają regulacji lub innych kontroli sekwencji, a więc może być używany do identyfikacji (sonda) i wyizolować geny i ich skojarzone z genomowego DNA.