O enzimă care catalizatori o reacţie care leagă două molecule de ADN prin formarea de un phospho-diester legătură între 3´ hidroxil şi 5´ fosfat de nucleotide adiacente. Acesta joacă un rol important în repararea ADN-ului şi replicare. ADN-ul ligase este unul dintre instrumentele esenţiale tehnologiei ADN-ului recombinant, permite (printre altele) încorporarea ADN-ul străin în vectori. Ligase enzimei codificate de Bacteriofagul T4 este frecvent utilizate în experimente clonarea. Este nevoie de ATP ca un cofactor. T4 este folosit in vitro pentru a se alăture vector şi introduceţi DNAs.