Dvojitý-plietol DNA doplnkom sekvenciu mRNA; syntetizované v vitro zo zrelých RNA šablóny pomocou reverznej transkriptázy (vytvoriť jediný prameň DNA od RNA šablónu) a DNA-polymeráza (vytvoriť dvojitý-plietol DNA). Prípravy cDNAs je často prvým krokom v klonovanie DNA sekvencií záujmu. Použité ako osobitný a citlivý sondy v štúdiách hybridizácie, pretože cDNAs zvyčajne nezahŕňajú regulačných alebo iných kontrolu sekvencie, a tak môžu byť použité na identifikáciu (sonda) a izolovať gény a ich pridružené sekvencie z genomická DNA.