Ett enzym som katalyserar en reaktion som länkar två DNA-molekyler via bildandet av en fosfor-diesteren förbindelsen mellan det 3´ hydroxyl och 5´ fosfatet av intilliggande nukleotider. Spelar en viktig roll i DNA-reparation och replikering. DNA-ligase är en av de viktigaste verktygen för rekombinant DNA-teknik, möjliggör införlivandet av främmande DNA i vektorer (bland annat). Enzymet ligase kodas av phage T4 används ofta i gen-kloning experiment. Det kräver ATP som en kofaktor. T4 är används i vitro att gå med vektorn och infoga DNAs.