தொழில்நுட்பம், எந்த டிஎன்ஏ செருகு மற்றும் கடைப்பிடிக்கும்படி மூலக்கூறுகள் உள்ளன digested கொண்டு ஒவ்வொரு வரையறை முழுமையற்ற, எனவே நுழை உள்ள ஒரு குறிப்பிட்ட திசை கடைப்பிடிக்கும்படி செய்ய ligated செய்ய அனுமதித்தது மற்றும் மறு-circularizing, கடைப்பிடிக்கும்படி தடுக்கிறது இருபுறமும் முடிவில் முன்பவருக்-அல்லாத ஒட்டு முடிவடைந்தவுடன் உருவாக்க இரு வேறு வரையறை செரிக்கும்.